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MeCAT Proteomik Kits

MeCAT Duplex Kit für die Proteomik

Das MeCAT Duplex Kit wurde für die differentielle Markierung von Proteinen und Proteingemischen entwickelt, um die Proteinprofile (Proteome) von zwei Proben quantitativ zu vergleichen. Mittels ICP-MS ist eine absolute Quantifizierung von Proteinen möglich.
Das Kit enthält MeCAT Reagenz für 16 Markierungsreaktionen (8 + 8) sowie notwendige Puffer und Reagenzien. Die beiden verschiedenen MECAT-Metall-Markierungsreagenzien (Duplex Kit: 8x leichtes Lanthanid und 8x schweres Lanthanid) reichen jeweils zur Markierung von 50-100 µg Protein pro Reaktion.

MeCAT Workflow

• Proteinextraktion aus den zu vergleichenden Proben
• Proteinbestimmung
• Markierung der Proben mit dem leichten bzw. schweren MeCAT-Reagenz
• Poolen der beiden differentiell markierten Proben
• Trennung der MeCAT markierten Proteine mit 2DE, SDS-PAGE oder LC
• (Absolute) Quantifizierung von Proteinbanden/peaks mit ICP-MS
• Identifkation mit ESI-MS oer MALDI-MS

Picture: MeCAT - Metal Coded Tagging Technolgy - for (absolute) protein quantification. Presentation at DGMS Workshop Quantitative Proteomics, Bremen 2007 (pdf document)

Picture: Example MeCAT Workflow - Ultra sensitive absolute and relative MeCAT protein quantification is performed by ICP-MS (inductively coupled plasma mass spectrometry) on protein level down to low attomol range. Proteins can be identified and relatively quantified on peptide level by MALDI-MS an ESI-MSMS. Metal standard solutions are used for high accuracy external protein independent calibration of ICP-MS.