Proteinsequenzierung |
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N-terminale und interne Proteinsequenzierung
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Die Proteome Factory setzt für die N-terminale Proteinsequenzierung und N-terminale Peptidsequenzierung einen modernen Applied Biosystems Model 491 Procise Edman Sequencer mit online ABI Model 140C PTH Amino Acid Analyser ein. Die N-terminale Sequenzierung von Proteinen und Peptiden läuft dabei nach einem chemischen Reaktionszyklus ab, der auf die Entwicklungen von Pehr Edman zurückgeht. Zunächst wird dabei die freie N-terminale Aminosäure mit Phenylisothiocyanat (PITC) unter alkalischen Bedingungen umgesetzt. Unter sauren Bedingungen erfolgt anschließend die Abspaltung dieser PTC- markierten Aminosäure, die vom Restpeptid getrennt nach Umwandlung in ihre PTH- (Phenylthiohydantoin) Aminosäure über ein chromatographisches Verfahren identifiziert wird. Der Edman-Zyklus wird mit dem Restpeptid mehrfach wiederholt, wodurch die Aminosäuresequenz bestimmt wird. |
N-terminale Proteinsequenzierung mit Procise Edman Sequenzer |
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Auftragsanalytik: N-terminale Sequenzierung
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Das Dienstleistungsangebot der N-terminalen Sequenzierung wird für Proteine und Peptide angeboten, die als lyophilisierte, flüssige oder auf PVDF Membran geblottete Proteinproben vorliegen. Je nach verfügbarer Probenmenge und Anforderung können 5 bis 40 Aminosäurereste durch N-terminale Sequenzierung bestimmt werden. |
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Dienstleistung: Interne Proteinsequenzierung
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Die interne Proteinsequenzierung wird als Auftragsanalytik angeboten. Die Proben können lyophilisiert, in Lösung, in Proteingelbanden oder auf PVDF-Membran vorliegen. Sie liefert sehr wertvolle Informationen bei der Komplettsequenzierung und Charakterisierung von Proteinen und wird oft eingesetzt, wenn Sequenzinformationen von N-terminal blockierten Proteinen gewonnen werden müssen. |
Interne Proteinsequenzierung Nach enzymatischer Spaltung werden die Peptide eines Proteins mit RP-HPLC aufgetrennt, fraktioniert und mittels N-terminaler Sequenzierung analysiert. |
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